Efeito osteogênico de membranas com hidroxiapatita dopada com diferentes concentrações de íons magnésio e estrôncio

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Data
2025
Autores
Galloro, Myllene Bossolani
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Editor
UNISA
Resumo
A associação de compostos inorgânicos a polímeros sintéticos na síntese de matrizes de suporte celular é uma alternativa bastante vantajosa para se aliar as propriedades dos dois tipos de materiais. Os objetivos deste estudo foram: (1) sintetizar hidroxiapatita (HA) convencional e HA modificada com magnésio (Mg²*) e estrôncio (Sr²*) em duas proporções diferentes; (2) sintetizar membranas eletrofiadas de poli-L-lactideo (PLLA) puro ou enriquecido com essas três HA sintetizadas; (3) avaliar a proliferação, osteocondutividade, e osteodiferenciação de células-tronco do ligamento periodontal humano (hPDLSCs) cultivadas nessas estruturas; (4) avaliar a matriz extracelular (MEC) formada por cultura de hPDLSC sobre estas malhas. Para isso, HA foi sintetizada convencionalmente ou substituindo 15 mol% cálcio por Mg2+ ou estroncio Sr2+, 7,5 mol% cada (PLLA HA M1) ou 10 mol% Mg2+ e 5 mol% Sr² (PLLA_HA_M2). Os cristais foram caracterizados por difração de raios-X (DRX) e espectroscopia de emissão óptica com plasma indutivamente acoplado (ICP-OES). Membranas de PLLA foram eletrofiadas com 10% de HA convencionais ou modificadas e caracterizadas por microscopia eletrônica de varredura (MEV). HPDLSCs foram isolados e cultivados para análise da proliferação celular em 1 e 7 dias em meio clonogênico, e da osteodiferenciação celular, pelo ensaio de fosfatase alcalina aos 7 dias, e ensaio de vermelho de alizarina aos 21 dias de cultivo, ambos em meio clonogênico e osteogênico. A quantificação de colágeno e glicosaminoglicanos (GAG) da MEC foi realizada por ensaios colorimétricos em 7 e 21 dias em meio clonogênico. Dados foram analisados por meio de ANOVA de fator único e teste de Tukey (a=0,05). A análise de DRX confirmou a síntese de hidroxiapatita. ICP-OES indicou que a adição de 7,5 mol% de cada ion durante a síntese resultou na incorporação de 5% em peso de Mg2+ e 15% em peso de Sr², enquanto a adição de 10 mol% de Mg2+ e 5 mol% de Sr² resultou em 5% em peso de Mg2+ e 10% em peso de Sr²*. A MEV mostrou membranas tridimensionais porosa em todos os materiais. A proliferação celular foi semelhante entre todos materiais no dia 1, e maior no material com PLLA HA M2 no dia 7. Em meio osteogênico, a atividade da fosfatase alcalina e vermelho de alizarina não diferiram entre os grupos. Em meio clonogênico, PLLA_HA_M2 apresentou maior mineralização da matriz extracelular e maior atividade de fosfatase. A produção de colágeno foi menor nos grupos dopados após 7 dias de cultura. PLLA_HA_M2 produziu maior quantidade de sulfato de condroitina A e C, enquanto PLLA produziu maior quantidade de dermantan sulfato. Conclui-se que a síntese de HA e a eletrofiação das membranas foi adequada. A incorporação de níveis mais baixos de Sr²* na HA promoveu membranas com maior capacidade de osteodiferenciação e proliferação celular que os materiais com HA convencional. Os materiais dopados promoveram alteraçãoes sintese de MEC, promovendo maior diferenciação osteogênica de hPDLSC.
Descrição
Palavras-chave
Osteodiferenciação, Poli-lactídeo, Hidroxiapatita, Dopagem com Magnésio e Estrôncio, Engenharia de Tecidos Ósseos
Citação
GALLORO, Myllene Bossolani. Efeito osteogênico de membranas com hidroxiapatita dopada com diferentes concentrações de íons magnésio e estrôncio. Orientadora: Flávia Gonçalves. 2025. 78 f. Tese (Doutorado em Odontologia) - Universidade Santo Amaro, São Paulo, 2025.